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主營：原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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在原位雜交過程中，需要使用標記的核酸探針，通常是在性核素或非性物質(zhì)中標記的。這些探針可以通過不同的方式制備，例如從已知序列的DNA或RNA制備，原位雜交，或者通過使用生物信息學方法設(shè)計和合成新的探針。
在進行原位雜交時，原位雜交公司，細胞或組織需要固定在適當?shù)闹С治锷希巛d玻片。然后，原位雜交試劑，探針與細胞或組織中的DNA或RNA進行雜交，通常是在加熱條件下進行的。接下來，通過洗滌和顯影步驟去除未結(jié)合的探針和信號增強劑，后用顯微鏡觀察雜交信號的位置。
植物原位雜交在遺傳育種方面的應(yīng)用主要包括：
異源染色質(zhì)及多種染色體畸變檢測：通過遠緣雜交把有用遺傳物質(zhì)基因的異源染色質(zhì)漸滲到植物中。如帶有幾種抗病基因的黑麥1R染色體已被整合到許多高產(chǎn)的小麥品種中。原位雜交技術(shù)則是鑒定外源染色體(質(zhì))的有效手段。
基因組印記研究：基因組印記是指一個基因的兩條染色體上的DNA序列存在差異。通過植物原位雜交技術(shù)，可以檢測到基因組印記的存在和分布，從而幫助確定基因組的進化、遺傳和功能特征。
同一樣本可以多次做原位雜交實驗嗎?
一般情況下，ISH，如果操作沒有得到理想的結(jié)果，是可以將探針洗滌然后進行再次的雜交的。如果使用的是直標型探針，還可以使用不同探針對同一樣本進行反復雜交。針對不同的樣本，處理方法略有不同。
原位雜交實操中哪些因素比較重要?
重要的因素：溫度、光照、濕度和試劑的PH值。溫度和濕度直接影響著探針和目標DNA的雜交效率；光照影響著熒光染料的強度，所以探針要避光保存，其已經(jīng)雜交的片子可用防熒光淬火劑封片且避光保存；各種試劑pH也要達到要求，這也直接關(guān)系到原位雜交的穩(wěn)定性。
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第3年
