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(1) 在一張保鮮膜上制作一個裝有0.5mol/L NaOH的小洼(0.75ml),使菌落面朝上,將濾膜放到小洼上,展平保鮮膜,使濾膜均勻濕潤,讓濾膜留于原處2-3分鐘。
(2) 用干紙巾從濾膜的下方吸干濾膜,用一張新的保鮮膜和新配制的0.5mol/L NaOH重復步驟(1)。
(3) 吸干濾膜,將濾膜轉移到新的帶有1mol/L Tris·Cl(pH7.4)的保鮮膜洼上。5分鐘后吸干濾膜,再重復一次該步驟。
(4) 吸干濾膜,把它轉移到有1.5mol/L NaCl、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4)的保鮮膜小洼上5分鐘后吸干濾膜,原位雜交技術,轉移到一張干的濾紙上,置于室溫20-30分鐘,使濾膜干燥。
(5) 將濾膜夾在兩張干的濾紙之間,在真空烤箱中于80℃干烤2小時,原位雜交公司,固定DNA。
(6) 將固定在膜上的DNA與32 P標記的RNA進行雜交。

原位雜交技術還在以下生物領域有應用:
細胞化學和學:原位雜交技術可以用于研究細胞內特定化學物質的定位和分布,例如檢測細胞內酶、、神經(jīng)遞質等物質的分布和定位。此外,GISH,還可以應用于學研究,原位雜交,例如檢測細胞、分子的分布和定位等。
神經(jīng)科學:在神經(jīng)科學領域,原位雜交技術常被用于研究神經(jīng)元的生長、發(fā)育和連接等過程。例如,通過標記特定基因的探針,可以檢測神經(jīng)元中特定基因的表達和定位,進而研究其在神經(jīng)信號傳遞、神經(jīng)環(huán)路形成等方面的作用。

原位雜交技術的實驗結果
原位雜交技術的實驗結果包括陽性信號和陰性信號的判斷標準。陽性信號是指探針與目標核酸序列特異性結合形成的雙鏈復合物,在顯色反應、熒光染色或性同位素標記下呈現(xiàn)出明顯的信號。陰性信號是指探針未與目標核酸序列結合,不呈現(xiàn)任何信號。實驗結果的分析需要結合探針的特異性和敏感性、組織或細胞的原始結構以及實驗條件等因素綜合進行。

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