





外泌體可通過多種小分子進(jìn)行修飾,因此逐漸成為遞送治1療藥1物的有效載體。研究發(fā)現(xiàn),GRP78 在索拉菲尼耐藥癌細(xì)胞中,相對于索拉菲尼敏感癌細(xì)胞中顯著過表達(dá),因此,可能是 HCC 治1療的潛在靶點(diǎn)。
在這項(xiàng)研究中,錦州醫(yī)學(xué)院趙亮課題組通過修飾 BM-MSCs 以表達(dá)外泌體 siGRP78,證明了 siGRP78 修飾的外泌體與索拉1非尼聯(lián)合能夠靶向肝細(xì)胞癌細(xì)胞中的 GRP78 并抑制其生長和體外癌細(xì)胞的侵襲。此外,siGRP78 修飾外泌體與索拉1非尼聯(lián)合也抑制體內(nèi)癌細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移。證明了 siGRP78 修飾的外泌體可以使索拉1非尼耐藥的癌細(xì)胞對索拉1非尼敏感并逆轉(zhuǎn)耐藥性。
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據(jù)國際細(xì)胞外囊泡學(xué)會(huì)(ISEV)在2014年的提議,外泌體鑒定3個(gè)標(biāo)志:透射電鏡(transmission electron microscope,外泌體電鏡檢測,TEM)、粒徑(Nanoparticle Tracking Analysis, NTA)、蛋白標(biāo)志物(Western Blot, WB)。
外泌體透射電鏡TEM鑒定外泌體大小、形態(tài),判斷樣本是否含有外泌體。
外泌體透射電鏡分辨率為0.1~0.2nm,適合外泌體雙層囊膜超微結(jié)構(gòu)觀察,可觀測樣本中是否存在外泌體樣結(jié)構(gòu)(通常為茶托型或一側(cè)凹陷的半球形),同時(shí)可測量外泌體大小。
檢測平臺(tái):TecnaiTM G2 Spirit BioTWIN
檢測結(jié)果:三張透射電鏡圖片,盡可能體現(xiàn)完整的外泌體形態(tài)(如有)
檢測周期:10-15個(gè)工作日

樣本準(zhǔn)備
1. 提供外泌體懸液即可,未純化樣本也可以上機(jī)檢測;
注意:NTA僅提供粒徑分布情況和顆粒濃度,無法區(qū)分外泌體與非外泌體成分;當(dāng)然也可先利用外泌體特異性標(biāo)記物進(jìn)行熒光標(biāo)記,則可以獲知外泌體特定亞群的含量。
2.儀器的檢測區(qū)間是10^7 particles/ml,外泌體電鏡,且有濃度檢測下限,為10^5 particles/ml,進(jìn)樣量不少于2ml;一般來說,外泌體電鏡測試服務(wù),會(huì)對樣本稀釋后進(jìn)樣;
我司無法準(zhǔn)確建議送樣量;檢測需要量與樣本本身濃度有關(guān),樣本濃,則用量小,反之則多,根據(jù)檢測經(jīng)驗(yàn),樣本取用量一般在2μl-100μl不等,外泌體電鏡檢測服務(wù),取用量大于50μl時(shí)大多由于樣本分泌量過低、提取失敗或者對樣本有過多稀釋。一般建議送樣量不低于30μl,如樣本珍貴,可聯(lián)系我司寄回,運(yùn)費(fèi)視具體情況收取。

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