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武漢貝科新肽科技有限公司

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動物組織原位雜交-貝科新肽(推薦商家)

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和其它實驗方法一樣,必須同時設(shè)對照試驗以證明其實驗結(jié)果特異性。對照試驗的設(shè)置須根據(jù)核酸探針和靶核苷酸的種類和現(xiàn)有的可能條件去選定。ISHH的優(yōu)點是它的高度特異性,它可測定組織、培養(yǎng)的單個細(xì)胞或細(xì)胞提取物中的核苷酸含量。應(yīng)用高敏感度的性標(biāo)記cRNA探針在理想的ISHH的實驗條件下檢測mRNA,其敏感度可達(dá)到20個mRNA拷貝/每個細(xì)胞。由于雙鏈DNA的穩(wěn)定性,在用ISHH定位DNA時很少發(fā)生丟失,動物組織原位雜交,降解,其敏感性高到能夠顯示在染色體鋪片上,有時甚至在組織切片上的單個基因拷貝。正因為如此,對ISHH結(jié)果的解釋應(yīng)持慎重態(tài)度,特別是前人未報告過的新發(fā)現(xiàn)。

熒光原位雜交(FISH)技術(shù)具有以下優(yōu)點:

可多重染色:利用不同的熒光染料標(biāo)記不同的探針,可以實現(xiàn)多重?zé)晒庠浑s交,從而同時檢測多個序列,提高實驗效率了。

高度創(chuàng)新性和性:FISH技術(shù)不僅可以用于研究已知基因或序列的染色體定位,還可以用于未基因或遺傳標(biāo)記及染色體畸變的研究,在基因定性、定量、整合、表達(dá)等方面的研究中頗具優(yōu)勢。

原位雜交技術(shù)(In situ hybridization,ISH)是分子生物學(xué)、組織化學(xué)及細(xì)胞學(xué)相結(jié)合而產(chǎn)生的一門新興技術(shù),始于20世紀(jì)60年代。1969年美國耶魯大學(xué)的Gall等(1969)首先用爪蟾核糖體基因探針與其卵母細(xì)胞雜交,將該基因進(jìn)行定位,與此同時Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相繼利用同位素標(biāo)記核酸探針進(jìn)行了細(xì)胞或組織的基因定位,從而創(chuàng)造了原位雜交技術(shù)。自此以后,由于分子生物學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展,特別是20世紀(jì)70年代末到80年代初,分子、質(zhì)粒和噬菌體DNA的構(gòu)建成功,為原位雜交技術(shù)的發(fā)展奠定了深厚的技術(shù)基礎(chǔ)。

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