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植物染色體原位雜交測試服務(wù)-武漢科銳諾

詢盤留言 |投訴|申領(lǐng)|刪除 產(chǎn)品編號:600533442                    更新時間:2025-08-01
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分子病理診斷,是指應(yīng)用分子生物學(xué)技術(shù),從基因水平上檢測細(xì)胞和組織的分子遺傳學(xué)變化,以協(xié)助病理診斷和分型、指導(dǎo)靶向、預(yù)測反應(yīng)及判斷預(yù)后的一種病理診斷技術(shù)。分子病理診斷又稱分子病理檢查、分子病理檢測、分子病理技術(shù)。從本質(zhì)上講,凡是基于組織和細(xì)胞分子水平上的疾病診斷都是分子病理診斷,植物染色體原位雜交測試服務(wù),這是廣義的分子病理診斷,如組化診斷。但目前公認(rèn)的是狹義的分子病理診斷,即基于細(xì)胞或組織基因水平的病理診斷。

癌組織原位雜交實(shí)驗(yàn)步驟:

1. 將準(zhǔn)備做原位雜交的樣本常規(guī)脫水、浸蠟、包埋。切片厚度6-8μm。

2. 玻片的處理:一般采用多聚賴氨酸或APES。

3. 石蠟切片經(jīng)常規(guī)脫蠟至水。30%H2O2 1份+蒸餾水10份混合,室溫5-10分鐘以滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。

4. 暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%檸檬酸新鮮稀釋的胃蛋白酶(1ml 3% 檸檬酸加2滴濃縮型胃蛋白酶,混勻),37℃或室溫消化3--30分鐘(視標(biāo)本新舊、厚薄自行調(diào)整)。原位雜交用PBS洗3次×5分鐘。蒸餾水洗1次。

.雜交?。?) 盛有2×SSC的塑料盤同,將干烤的濾膜飄浮在液面上,浸濕5分鐘。(2) 將濾膜轉(zhuǎn)到200ml預(yù)洗液的玻璃皿中。濾膜何疊在一起,放于溶液中。用保鮮膜蓋住玻璃皿,放到位于培養(yǎng)箱內(nèi)的旋轉(zhuǎn)平臺上。于50℃處理30分鐘。在這一步及以后的所有步驟中,應(yīng)緩緩搖動濾膜,防止它們粘在一起。(3) 用泡過預(yù)洗液的吸水棉紙輕輕地從膜表面拭去細(xì)菌碎片,以降低雜交背景而不影響陽性雜交信號的強(qiáng)度和清晰度。(4) 將濾膜轉(zhuǎn)到盛有150ml預(yù)雜交液的玻璃中,在適宜溫度(即在水溶液中雜交時用68℃,而在50%甲酰胺中雜交時用42℃)下,預(yù)雜交1-2小時。(5) 將32 P標(biāo)記的雙鏈DNA探針于100℃加熱5分鐘,迅速置于冰浴中。單鏈探針不必變性。將探針加到雜交袋中雜交過夜。雜交期間,盛濾膜的容器應(yīng)蓋嚴(yán),以防液體蒸發(fā)。

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