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武漢貝科新肽科技有限公司

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原位雜交檢測-原位雜交-武漢貝科新肽公司

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以菌落原位雜交為例:對分散在若干個瓊脂平板上的少數(shù)菌落(100-200)進行篩選時,可采用該方法。將這些菌落歸并到一個瓊脂主平板以及已置于第二個瓊脂平板表面的一張纖維素濾膜上。經(jīng)培養(yǎng)一段時間后,對菌落進行原位裂解。主平板應(yīng)貯存于4℃直至得到篩選結(jié)果。

將少數(shù)菌落轉(zhuǎn)移到纖維素濾膜上

(1) 在含有選擇性的瓊脂平板上放一張纖維素濾膜。

(2) 用無菌牙簽將各個菌落先轉(zhuǎn)移至濾膜上,再轉(zhuǎn)移至含有選擇性但未放濾膜的瓊脂主平板上。應(yīng)按一定的格子進行劃線接種(或打點)。每菌落應(yīng)分別劃線于兩個平板的相同位置上。后,在濾膜和主平板上同時劃一個含有非重組質(zhì)粒的菌落。

(3) 倒置平板,于37℃培養(yǎng)至劃線的細菌菌落生長到0.5-1.0mm的寬度。

(4) 用已裝防水黑色繪圖墨水的針頭穿透濾膜直至瓊脂,在3個以上的不對稱位置作標記。在主平板大致相同的位置上也作上標記。

(5) 用Parafilm膜封好主平板,倒置貯放于4℃,直至獲得雜交反應(yīng)的結(jié)果。

(6) 裂解細菌,原位雜交,按本段下面所述方法,使釋放的DNA結(jié)合于纖維素濾膜。

 RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。該技術(shù)是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內(nèi)RNA表達的一種原位雜交技術(shù)。其基本原理是:在細胞或組織結(jié)構(gòu)保持不變的條件下,用標記的已知的RNA核苷酸片段,按核酸雜交中堿基配對原則,與待測細胞或組織中相應(yīng)的基因片段相結(jié)合(雜交),所形成的雜交體(Hybrids)經(jīng)顯色反應(yīng)后在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內(nèi)相應(yīng)的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術(shù)經(jīng)不斷改進,其應(yīng)用的領(lǐng)域已遠超出DNA原位雜交技術(shù)。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已成為有效的分子病理學技術(shù),同時在分析低豐度和罕見的mRNA表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。

原位雜交技術(shù)在其他生物領(lǐng)域也有廣泛的應(yīng)用,植物原位雜交,例如:

動物行為學研究:在動物行為學中,原位雜交技術(shù)可以用于檢測動物行為與基因表達之間的關(guān)系。例如,通過比較不同行為狀態(tài)下動物腦組織中基因表達的差異,可以揭示特定基因?qū)游镄袨榈挠绊憽?/p>

生物技術(shù)應(yīng)用:原位雜交技術(shù)在生物技術(shù)領(lǐng)域也有廣泛應(yīng)用,例如在基因、基因編輯和開發(fā)等方面。例如,通過原位雜交技術(shù)可以定位和特定基因,為基因和基因編輯提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和工具。

原位雜交檢測-原位雜交-武漢貝科新肽公司由武漢貝科新肽科技有限公司提供。“原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選”選擇武漢貝科新肽科技有限公司,公司位于:湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號,多年來,貝科新肽堅持為客戶提供好的服務(wù),聯(lián)系人:夏先生。歡迎廣大新老客戶來電,來函,親臨指導,洽談業(yè)務(wù)。貝科新肽期待成為您的長期合作伙伴!

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