在藥物分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品安全等領(lǐng)域，高效液相色譜（HPLC）及其衍生技術(shù)（如UPLC）是核心的分析工具。為了確保這些方法能可靠、準(zhǔn)確地用于其預(yù)定目的，必須進(jìn)行嚴(yán)格的方法學(xué)驗(yàn)證。其主要驗(yàn)證項(xiàng)目包括：

1.專屬性/特異性：證明方法能準(zhǔn)確區(qū)分目標(biāo)分析物與可能共存的雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、基質(zhì)成分等干擾物質(zhì)的能力。這是方法可靠性的基石。

2.準(zhǔn)確度：指測(cè)定結(jié)果與真實(shí)值（或公認(rèn)參考值）的接近程度。通常通過在已知濃度的樣品（如加標(biāo)空白基質(zhì)）中進(jìn)行回收率試驗(yàn)來評(píng)估。

3.精密度：

*重復(fù)性：在短時(shí)間內(nèi)，由同一操作者使用同一儀器，對(duì)同一樣品進(jìn)行多次測(cè)定的接近程度（日內(nèi)精密度）。

*中間精密度：考察方法在不同實(shí)驗(yàn)日、不同操作者、不同儀器（同一實(shí)驗(yàn)室）等變化因素下的精密度。

*重現(xiàn)性：（通常指實(shí)驗(yàn)室間）在不同實(shí)驗(yàn)室間執(zhí)行同一方法的精密度。

4.線性：在設(shè)定的濃度范圍內(nèi)，檢測(cè)響應(yīng)值（如峰面積）與分析物濃度成比例關(guān)系的能力。通過一系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液建立校準(zhǔn)曲線并評(píng)估其線性。

5.范圍：指能達(dá)到可接受的準(zhǔn)確度、精密度和線性的濃度區(qū)間。通常涵蓋從定量限（LOQ）到上限濃度的范圍，應(yīng)覆蓋實(shí)際樣品預(yù)期的濃度。

6.檢測(cè)限（LOD）：分析物能被可靠地檢測(cè)到（信噪比S/N≥3），但尚不能準(zhǔn)確定量的最低濃度。

7.定量限（LOQ）：分析物在可接受的準(zhǔn)確度和精密度水平下能夠被定量測(cè)定的最低濃度（信噪比S/N≥10）。

8.耐用性/穩(wěn)健性：評(píng)估方法參數(shù)（如流動(dòng)相比例、pH值、流速、柱溫、不同品牌色譜柱等）發(fā)生微小、有意變化時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的能力。這預(yù)示了方法在日常使用中的穩(wěn)定性。

廣州中森檢測(cè)與系統(tǒng)適用性測(cè)試（SST）

在方法學(xué)驗(yàn)證完成并建立后，每次正式運(yùn)行液相檢測(cè)前，都必須進(jìn)行系統(tǒng)適用性測(cè)試（SST）。廣州中森檢測(cè)等專業(yè)機(jī)構(gòu)在開展檢測(cè)服務(wù)時(shí)，會(huì)嚴(yán)格遵循此步驟。

SST的目的是確保整個(gè)分析系統(tǒng)（儀器、色譜柱、流動(dòng)相、操作）在分析當(dāng)天能滿足方法驗(yàn)證時(shí)確立的性能標(biāo)準(zhǔn)，是方法能否成功應(yīng)用于具體檢測(cè)的“通行證”。

典型的SST參數(shù)包括：

*理論塔板數(shù)（N）：衡量色譜柱效能的指標(biāo)。

*拖尾因子（T）：評(píng)估色譜峰對(duì)稱性，過大表示可能存在吸附或柱效問題。

*分離度（R）：衡量相鄰色譜峰分離程度的關(guān)鍵指標(biāo)，尤其對(duì)于多組分分析。

*重復(fù)性：通常通過連續(xù)進(jìn)樣標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌啡芤海ㄈ?-6針）計(jì)算主峰保留時(shí)間和峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD%），評(píng)估系統(tǒng)的精密度。

*容量因子（k'）：反映分析物在固定相上的保留強(qiáng)度。

*壓力波動(dòng)：監(jiān)測(cè)系統(tǒng)壓力穩(wěn)定性。

廣州中森檢測(cè)會(huì)在每次檢測(cè)前，按照具體方法的規(guī)定，配制特定的系統(tǒng)適用性溶液（通常是標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌啡芤海\(yùn)行并計(jì)算上述關(guān)鍵參數(shù)。只有當(dāng)所有SST結(jié)果均符合方法預(yù)設(shè)的接受標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，才會(huì)開始正式樣品的分析，從而最大限度地保證檢測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性。

總結(jié)：方法學(xué)驗(yàn)證是建立可靠液相分析方法的基礎(chǔ)，涵蓋專屬性、準(zhǔn)確度、精密度等關(guān)鍵性能指標(biāo)。而系統(tǒng)適用性測(cè)試（SST）則是驗(yàn)證后方法在每次具體應(yīng)用時(shí)的“守門員”，確保分析系統(tǒng)在檢測(cè)當(dāng)天處于可控且符合要求的狀態(tài)，兩者缺一不可，共同保障了液相檢測(cè)結(jié)果的質(zhì)量。