

臨床診斷液質(zhì)聯(lián)用檢測血樣需要抗凝嗎?
答案是:絕大多數(shù)情況下需要,并且需要選擇合適的抗凝劑。原因如下:
1.區(qū)分血漿與血清:液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS/MS)檢測的目標分析物(如藥物、激素、代謝物、維生素等)通常存在于血液的液體部分。
*血清:是血液自然凝固后分離出的液體,不含纖維蛋白原和大部分凝血因子。獲得血清不需要抗凝劑,但需要等待血液凝固(約30-60分鐘)。
*血漿:是加入抗凝劑阻止血液凝固后,離心分離出的液體,含有纖維蛋白原。獲得血漿必須使用抗凝劑。
2.LC-MS/MS檢測的偏好:
*血漿是首選:絕大多數(shù)臨床LC-MS/MS檢測項目推薦使用血漿作為樣本。主要原因:
*避免凝血過程的影響:血液凝固過程會激活血小板、釋放細胞內(nèi)物質(zhì)、消耗某些成分(如補體、凝血因子),可能改變待測分析物的濃度或引入干擾物質(zhì)。使用抗凝劑能立即阻止凝血,最大程度保持樣本原始狀態(tài)。
*更快的處理速度:采血后加入抗凝劑混勻即可離心分離血漿,無需等待凝血,縮短樣本前處理時間,尤其對不穩(wěn)定分析物有利。
*更高的樣本量:血漿的得率通常略高于血清(約15-20%)。
*血清的使用:雖然血清也可用于某些LC-MS/MS檢測(尤其是一些激素、腫瘤標志物等),但通常是在特定方法學要求或歷史沿襲下使用。除非檢測項目的標準操作規(guī)程(SOP)明確指定使用血清,否則應優(yōu)先使用血漿。
廣州中森檢測抗凝劑選擇的關(guān)鍵考量
選擇合適的抗凝劑至關(guān)重要,因為不同的抗凝劑可能通過以下方式干擾LC-MS/MS檢測:
*化學干擾:抗凝劑本身或其離子可能抑制或增強目標分析物的離子化效率,影響檢測靈敏度和準確性。
*金屬螯合:某些抗凝劑(如EDTA)會強力螯合金屬離子(如鈣、鎂、鋅),這可能影響依賴金屬離子的酶活性(雖然LC-MS/MS通常不直接測酶活性,但可能影響某些代謝物或藥物結(jié)合狀態(tài))。
*基質(zhì)效應:不同抗凝劑會導致血漿基質(zhì)成分略有差異,可能影響分析物在色譜柱上的保留行為或離子化過程。
*目標分析物的穩(wěn)定性:某些抗凝劑可能有助于穩(wěn)定特定的不穩(wěn)定分析物。
廣州中森檢測(以及其他專業(yè)臨床檢測實驗室)在選擇抗凝劑時,會嚴格遵循以下原則:
1.檢測項目特異性:這是首要原則!實驗室針對每一個具體的檢測項目,都會基于方法學驗證和行業(yè)指南,明確規(guī)定所需的樣本類型(血漿/血清)和具體的抗凝劑種類。用戶必須嚴格按照檢測項目說明書或?qū)嶒炇乙蟛杉瘶颖尽?/p>
2.常用抗凝劑及其特點(在LC-MS/MS中的常見選擇):
*肝素(鋰鹽或鈉鹽):
*最常見首選:肝素(尤其是肝素鋰)是LC-MS/MS檢測(如治療藥物監(jiān)測TDM、類固醇激素、維生素D、兒茶酚胺代謝物等)中使用最廣泛的抗凝劑。
*優(yōu)點:通過抑制凝血酶發(fā)揮作用,對大多數(shù)小分子分析物的干擾最小,對鈣離子濃度影響?。ǜ嗡劁囉燃眩c質(zhì)譜兼容性好,基質(zhì)效應相對較小。
*缺點:可能干擾某些PCR檢測(但對LC-MS/MS無影響)。
*乙二胺四乙酸(EDTA,通常為K?或K?鹽):
*常見選擇:也是廣泛使用的抗凝劑,尤其適用于血液學檢測和某些分子檢測。
*優(yōu)點:強力螯合鈣離子,抗凝效果好。
*缺點(LC-MS/MS中需特別注意):強螯合作用可能影響某些金屬依賴性分析物或酶活性檢測(雖然LC-MS/MS主要測濃度)。EDTA離子本身是強螯合劑,在高濃度時可能在質(zhì)譜中產(chǎn)生信號或?qū)е禄|(zhì)效應,需要方法學優(yōu)化。對于某些項目(如含金屬離子的藥物、某些微量元素、某些酶活性相關(guān)代謝物)可能不適用或需要特別驗證。
*檸檬酸鈉(如3.2%或3.8%):
*特定用途:主要用于凝血功能檢測。
*LC-MS/MS應用:在常規(guī)小分子LC-MS/MS檢測中相對較少作為首選。其緩沖作用和對鈣的螯合作用可能對某些項目有干擾。主要用于需要模擬體內(nèi)生理條件或特定凝血相關(guān)研究的檢測。
3.避免使用:
*草酸鹽/氟化物:通常用于血糖檢測(抑制糖酵解),但會對很多LC-MS/MS檢測產(chǎn)生嚴重干擾,應避免使用,除非檢測項目特別指定。
總結(jié)與給用戶的建議
1.必須抗凝:臨床診斷LC-MS/MS檢測絕大多數(shù)情況下要求使用血漿樣本,因此必須使用抗凝管。
2.嚴格遵循項目要求:廣州中森檢測會為每個檢測項目明確規(guī)定所需的抗凝劑類型(如肝素鋰、EDTA-K?等)或明確指出使用血清。在申請檢測或采樣前,務必查閱該項目的《樣本采集要求》或直接咨詢實驗室。
3.首選肝素(尤其肝素鋰):對于未明確指定或廣泛適用的小分子LC-MS/MS檢測(如TDM、激素、維生素等),肝素鋰抗凝血漿通常是默認和推薦的選擇,因其干擾最小,與質(zhì)譜兼容性最佳。
4.正確采集與處理:使用指定抗凝管,采血后立即輕柔顛倒混勻數(shù)次(通常5-10次),確??鼓齽┡c血液充分混合,避免凝塊或溶血。盡快離心分離血漿/血清,并按要求保存運輸。
簡而言之:液質(zhì)聯(lián)用檢測血樣絕大多數(shù)需要抗凝獲得血漿。廣州中森檢測會根據(jù)具體檢測項目的方法學要求,明確規(guī)定使用何種抗凝劑(最常用且兼容性好的是肝素鋰,其次是EDTA),用戶必須嚴格按項目要求采集樣本。切勿自行選擇抗凝劑。
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